Proteiinkinaaside spottimine pinnale ja kvantifitseerimine ARC-tüüpi sondiga

Date

2017

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Publisher

Tartu Ülikool

Abstract

Töö eesmärgiks oli uurida ARC-tüüpi sondiga proteiinkinaasi (PK) aktiivse hulga määramise võimalikkust proovi pinnale adsorbeerimise kaudu. Optimaalsete tingimuste leidmiseks uuriti muuhulgas erinevate pindade sidumismahtu, lahuse komponentide ja inkubeerimisaja pikkuse mõju katseetappides. Meetodit katsetati kolme erineva kinaasiga: PKAc, ROCK2 ning MSK1. Tutvustatav meetod on lihtsa teostatavusega ja võimaldab tuvastada aktiivse kinaasi hulka pikomoolides. Kuigi ARC-sondi põhise tuvastusmeetodiga, esinesid võrdlemisi suured erinevused paralleelkatsetes. Leiti, et adsorbeerunud aktiivse PK analüüsimine on võimalik. Meetodit saab rakendada erinevate PK-de puhul paralleelselt ja töö käigus selgunud tingimuste mõju annab olulist teavet meetodi edasiarendamiseks.

Description

Keywords

PK, ARC, ELISA, Ig

Citation