Browsing by Author "Pook, Martin, juhendaja"
Now showing 1 - 3 of 3
Results Per Page
Sort Options
Item Inimese embrüonaalsete tüvirakkude transfekteerimine siRNA-ga kasutades rakku sisenevat peptiidi PepFect 14(Tartu Ülikool, 2018) Ervin, Egle-Helene; Pook, Martin, juhendaja; Teino, Indrek, juhendaja; Maimets, Toivo, juhendaja; Tartu Ülikool. Loodus- ja täppisteaduste valdkond; Tartu Ülikool. Molekulaar- ja rakubioloogia instituutInimese embrüonaalsete tüvirakkude (hES rakud, ingl k human embryonic stem cells) potentsiaali rakendamine teaduses ja meditsiinis on osaliselt raskendatud seetõttu, et puudub efektiivne transfektsioonimeetod, mis ei mõjuks rakkude elulemusele ega pluripotentsusele. Käesolevas töös loodi uudne metoodika hES rakkude transfekteerimiseks siRNA-ga kasutades rakku sisenevat peptiidi PepFect 14 (PF14). Meetodi sobivuse ja spetsiifilisuse testimiseks kasutati sihtmärkidena pluripotentsusfaktorit OCT4 ning rakumembraanil paiknevat b-2-mikroglobuliini (B2M). Seejuures näidati, et PF14 vahendusel on võimalik vaigistada OCT4 ekspressioon vähemalt 70% rakkudest ja indutseerida mRNA taseme 10-kordne vähenemine. Lisaks selgus, et siRNA/PF14 kompleksid sobivad ka B2M ekspressiooni vaigistamiseks. Antud meetodi rakendatavust hES rakkudega seotud uuringutes kinnitab töös tuvastatud neuroektodermaalne diferentseerumine OCT4-siRNA transfektsiooni järgselt ning B2M ekspressiooni vähenemine antud diferentseerumise varajastel etappidel.Item Pluripotentsusega seotud markervalkude ekspressioon inimese kolorektaalse adenokartsinoomi Caco2 rakkudes(Tartu Ülikool, 2018) Kuus, Kaisa; Pook, Martin, juhendaja; Õunapuu, Ljudmila, juhendaja; Klepinin, Aleksandr, juhendaja; Tartu Ülikool. Loodus- ja täppisteaduste valdkond; Tartu Ülikool. Molekulaar- ja rakubioloogia instituutInimese kolorektaalse kasvaja rakkudes on eelnevalt kirjeldatud pluripotentsusega seotud transkriptsioonifaktorite markervalkude ekspressiooni RNA tasemel kuid tihti pole täpsemalt välja selgitatud spetsiifiliste transkripti vormide esinemist ja pole teada ka antud valkude ekspressioon. Antud magistritöö raames kirjeldati peamiste pluriotentsusega seotud markervalkude ekspressiooni Caco2 rakkudes ning tuvastati nende muutused rakkude diferentseerumisel buüraadiga. Leiti, et Caco2 rakud ekspresseerivad OCT4B transkripti, kuid butüraadiga diferentseerumisel seda enam ei detekteeritud. OCT4B1 transkript tuvastati vaid butüraadiga mõjutamise korral kuid selle tulemuse kinntamiseks on vaja teha rohkem korduskatsid. OCT4A transkripti ja valku Caco2 rakkudes ei esinenud. Olenemata butüraadiga mõjutamisest esines Caco2 rakkudes NANOG2 transkript ja NANOG2 valk, kuid NANOG1 puudus. Selgus, et SSEA4 ekpressioon suureneb ja SOX2 ekpressioon väheneb butüraadiga mõjutamise korral ning SSEA3 on ekspresseeritud vaid väga vähestes Caco2 rakkudes.Item Rakku sisenevate peptiidide rakendatavus miRNA transpordiks inimese embrüonaalsetesse tüvirakkudesse(Tartu Ülikool, 2014-06-17) Kasuk, Valmar; Pook, Martin, juhendaja; Lubenets, Dmitri, juhendaja; Tartu Ülikool. Loodus- ja tehnoloogiateaduskond; Tartu Ülikool. Molekulaar- ja rakubioloogia instituut