Probleemülesanne I
Probleemülesanne
0 lys1::kanMX x lys2-0
MET15 kodeerib metioniini ja tsüsteiini süntetaasi. Geeni deleteerimisel ei suuda rakud kasvada söötmel, milles puudub metioniin.
LYS1 kodeerib sahharopiin dehüdrogenaasi (katalüüsib lüsiini biosünteesi viimast etappi). Geeni deleteerimisel ei suuda rakud kasvada söötmel, milles puudub lüsiin. Antud tüves on LYS1 deleteerimiseks kasutatud kassetti (kanMX), mis tagab resistentsuse genetitsiini vastu.
LYS2 kodeerib 
-aminoadipaat reduktaasi (katalüüsib lüsiini biosünteesi 5. etappi). Geeni deleteerimisel ei kasva rakud söötmel, milles puudub lüsiin.
-aminoadipaat reduktaasi (katalüüsib lüsiini biosünteesi 5. etappi). Geeni deleteerimisel ei kasva rakud söötmel, milles puudub lüsiin.
Saadud diploid sporuleeriti ning viidi läbi tetraadide analüüs. Rikkal söötmel (YPD) kasvasid üles kõik eraldatud spoorid.
Seejärel viidi läbi tempelkülv erinevatele selektiivsöötmetele:
- Sc -lys; söötmes puudub lüsiin
- YPD + G418; rikkasse söötmesse on lisatud antibiootikumi genetitsiini
- Sc -met; söötmes puudub metioniin
Toodud on 8 tetraadi fenotüübid:
- Millist tüüpi tetraadid tekkisid geenipaari met15-
0 lys1::kanMX analüüsimisel (paneelid YPD+G418 ja Sc -met)? - Kas iga fenotüüp pärandub suhte 2:2 järgi? Kui ei, siis selgitage miks.
- Leidke kolooniad genotüübiga met15-0 lys1::kanMX lys2-0. Põhjendage valikut.
