Biosensor sinivetika toksiini mikrotsüstiin-LR määramiseks
Date
2019
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Tartu Ülikool
Abstract
Käesolevas bakalaureusetöös konstrueeriti antikeha-aptameer tuvastusmeetodil
põhinev biosensor mikrotsüstiin-LR määramiseks ning optimeerida mõõtmismetoodikat.
Mikrotsüstiin-LR on tsüanobakterite perekonna Microcystis poolt enimtoodetud
toksiin, mis esineb sinivetikate õitsemise ajal. Keemiliselt väga stabiilne ning poolestusajaga
kuni 120 päeva, kujutab MC-LR endast ohtu ka pikalt peale tsüanobakterite massilist
vohamist veekogudes. MC-LR, olles hepatotoksiin, kahjustab see organismi sattumisel
maksarakke ning halvimal juhul võib tekitada maksapuudulikkuse.
Biosensori konstrueerimine algas kasutatava aptameeri kontsentratsiooni
optimeerimisega. Kasutades erinevaid aptameeride kontsentratsioone koostati esiteks signaali
ning aptameeri omavaheline sõltuvusgraafik, mille põhjal otsustati aptameeri
kontsentratsioon järgnevateks katseteks. Otsuse tegemisel võeti arvesse nii signaali
intensiivsus kui ka aptameeride kontsentratsioon. Mõõtmisteks kõige optimaalsema
integratsiooniaja leidmiseks testiti kolme erinevat integratsiooniaega. Valikut tehes võeti
arvesse nii signaali tugevus, mis oli arvutatud puhta aptameeri lahuse mõõtesignaali ning
integratsiooniaja taustsignaali vahena, kui ka signaali amplituudi kõikumist.
Leiti lineaarne sõltuvus MC-LR kontsentratsiooni ning signaali vahel, tõestades et
antikeha-aptameer baasil põhinev biosensor mikrotsüstiin-LR määramiseks on võimalik.
Kuigi katsetega loodi baas uuele biosensor tehnoloogiale, siis tulevikus peab antud
tehnoloogiat täiustama, muutes sensori tundlikumaks, et oleks võimalik määrata Maailma
Terviseorganisatsiooni poolt ette antud piirmäär 1 μg/L.
Description
Keywords
biosensor, mikrotsüstiin-LR, sinivetikas, aptameer, antikeha