Bifunktsionaalsed streptavidiini teisendid: disain ja ekspressioon E. coli’s
Date
2016
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Tartu Ülikool
Abstract
Käesolevas bakalaureusetöös disainiti ja toodeti rekombinatseid valke, mis võimaldavad
kinnitada märgistatud bioloogilisi märklaudmolekule nii raku membraani kui tuuma ja
tsütoplasmasse. Märklaudmolekulide sidumiseks kasutati streptavidiini teisendeid: tetrameere
moodustavat streptavidiini ja kimäärset monomeerset streptavidiini. Raku membraani külge
kinnituvaks domeeniks valiti bakteriorodopsiini modifitseeritud C-heeliks ning rekombinantse
valgu lokaliseerimiseks raku tuuma ja tsütoplasmasse valiti penetratiin. E. coli’s
ekspresseerusid C-heeliksist ja kimäärsest monomeersest streptavidiinist koosnev
rekombinantne valk ning penetratiinist ja streptavidiinist koosnev rekombinantne valk.
Penetratiinist ja streptavidiinist koosnev rekombinantne valk moodustas tetrameere ja sidus biotiini.
Description
Keywords
streptavidiin, biotiin, penetratiin, bakteriorodopsiin