Proteiinkinaaside kvantifitseerimine immobiliseeritud ARC-Lum(Fluo) sondidega
Date
2017
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Tartu Ülikool
Abstract
Käesoleva töö eesmärgiks oli välja töötada aktiivse proteiinkinaasi kontsentratsiooni
määramise meetod. Meetod põhineb PKA ja teiste AGC rühma kinaaside suhtes kõrge
afiinsusega biotinüleeritud ARC-Lum(Fluo) sondide kasutamisel. Kompleksis
sihtmärkvalguga muutuvad ligandi luminestsentsomadused tugevalt, võimaldades aktiivse
kinaasi kontsentratsiooni määramist. ARC-Lum(Fluo) sondide pikk eluiga võimaldab
aeglahutusega luminestsentssignaali mõõtmist, millega saavutatakse parem signaal-müra suhe
ning kõrgem tundlikkus. Välja töötatud meetod on lihtne, kiire, madala reagentide kuluga ja
lubab pikomolaarsete kinaasi kontsentratsioonide tuvastamist ja kvantifitseerimist.
Description
Keywords
proteiinkinaasid, proteiinkinaaside inhibiitorid,, proteiinkinaaside määramine, aeglahutusega luminestsents, ARC-Lum(Fluo) sondid