Sirvi Autor "Kriisa, Marie" järgi

Nüüd näidatakse 1 - 1 1

Development of protein kinase-responsive photoluminescent probes and cellular regulators of protein phosphorylation
(2016-07-07) Kriisa, Marie; Uri, Asko, juhendaja; Tartu Ülikool. Loodus- ja täppisteaduste valdkond.
Proteiinkinaasid (PK-d) on olulised rakkude elutegevust reguleerivad ensüümid. Katalüüsides valkude fosforüülimist on nad tähtsaks lüliks rakusisestes signaalülekande radades. Häired PK-de normaalses funktsioneerimises, mis on tingitud nende liigsest aktiivsusest, üleekspressioonist või geenimutatsioonidest, on seotud mitmete haigustega, nagu vähkkasvajad, diabeet ja südame-veresoonkonna haigused. Sellest tulenevalt on PK-dest saanud viimase 15 aasta jooksul olulised ravimiarenduse sihtmärgid ning üle 30 PK inhibiitori on jõudnud kasutusele vähiravimitena. Lisaks on intensiivselt toimunud erinevate analüüsimeetodite arendamine uute efektiivsete ravimikandidaatide võimalikult kiireks väljatöötamiseks, PK-de toimemehhanismide ja signaalradade uurimiseks ning PK-de kui oluliste biomarkerite tuvastamiseks. Töös testiti uute ARC-ühendite võimet inhibeerida erinevaid PK-sid ning selgitati ARC-de nukleosiid-osa struktuuri mõju nende ainete inhibeerimispotentsiaalile erinevate PKde (PKAc, PKBγ and ROCK-II) suhtes. Leiti, et selle seeria ühenditest on just tiofeeni-sisaldavad ained suurima inhibeerimisvõimega. Edasistel biokeemilistel uuringutel avastati, et tiofeeni-sisaldavate ARC-de märgistamisel fluorestsentsvärvidega saadud fotoluminestsents-sondid omavad optilisi omadusi, mida pole varem orgaaniliste ainete puhul kirjeldatud. Selgus, et need ARC-Lum(Fluo)-sondid on PK-de aktiivsust registreerivad fotoluminestsents-sondid. Nende ühendite seostumisel PK-dega ning selle kompleksi ergastamisel kiirgusega lähis-UV alas emiteerivad nad spektri oranžis või punases piirkonnas aeglase sumbumisega (20–250 μs) valgust. Seega on need sondid kasutatavad PKde kontsentratsiooni määramiseks biokeemilistes ja bioloogilistes lahustes ning PK-de aktiivsuse seireks ja kaardistamiseks rakkudes. Käesolevas töös uuriti ka uute ARC-inhibiitorite kasutusvõimalusi valkude rakusiseste fosforüülimistasakaalude reguleerimisel. Näidati, et ARC-de suutlikkus mõjutada PK-de aktiivsust rakutuumades sõltub nii ainete inhibiitoromadustest kui ka nende võimest läbida raku plasmamembraani. Töös näidati, et arendatud ARC-inhibiitorid on rakendatavad PK-de aktiivsuse reguleerimiseks rakkudes ning rakkude signaalradade uurimiseks.