Browsing by Author "Viigand, Katrin"
Now showing 1 - 2 of 2
Results Per Page
Sort Options
Item Hansenula polymorpha MAL-lookus(2006) Viigand, Katrin; Alamäe, Tiina, juhendajaItem Utilization of α-glucosidic sugars by Ogataea (Hansenula) polymorpha(2018-08-27) Viigand, Katrin; Alamäe, Tiina, juhendaja; Tartu Ülikool. Loodus- ja täppisteaduste valdkondPärmid armastavad suhkruid, eelistades glükoosi – kui keskkonnas on palju glükoosi, siis pidurdatakse teiste suhkrute, nt α-glükosiidsete disahhariidide maltoosi ja sahharoosi kasutamist. Seda mehhanismi nimetatakse glükoosi repressiooniks. Maltoosi ja sahharoosi metabolismi on põhjalikult uuritud pagaripärmil Saccharomyces cerevisiae tema kasutuse tõttu pagari- ja õlletööstuses ning bioetanooli tootmisel. Õllepruulimisel on põhiline kääritatav suhkur linnasesuhkur ehk maltoos. Pagaripärmil paiknevad maltoosi kasutamiseks vajalikud geenid MAL-lookustes, mis asuvad telomeeride lähedal. Ka metülotroofne pärm (kasvab metanoolil) O. polymorpha kasvab maltoosil ja sahharoosil. Selle töö eesmärgiks oli iseloomustada α-glükosiidsete disahhariidide transporti ja metabolismi pärmil O. polymorpha. DNA sekveneerimisel tuvastati O. polymorpha’l neljageeniline MAL-lookus, mis kodeerib maltaas-isomaltaasi MAL1, α-glükosiidi permeaasi MAL2 ja kahte oletavat MAL-aktivaatorit. MAL1 ja MAL2 geenid on hädavajalikud α-glükosiidide kasutamiseks, kuid oletatavate MAL-aktivaatorgeenide funktsioon vajab veel tõestamist. MAL2 on laia substraadivalikuga prootonsümporter, mis transpordib paljusid α-glükosiidseid di- ja trisahhariide. Sarnase substraadivalikuga maltaas-isomaltaas MAL1 meenutab pagaripärmi maltaaside ja isomaltaaside hüpoteetilist eellast – nn ürgmaltaasi. MAL1 mutantide uurimine näitas, et ensüümi substraadi sidumistaskus võiks olla kaks pluss-sidumiskohta ning substraadieelistuse määramisel on valgus väga oluline Thr200. O. polymorpha MAL1-MAL2 geenide vahel on kahesuunaline promootorala, mis võimaldab mõlema geeni koosreguleerimist kasvusubstraatidega. O. polymorpha heksoosi kinaaside mutantide uurimisel selgus, et MAL1 promootori vaigistamiseks glükoosiga on vajalik glükoosi fosforüülimine rakus, samas toimib fosforüülimata glükoos promootori aktiveerijana. Püstitati hüpotees, et glükoos-6-fosfaat võiks toimida MAL1 promootorit represseeriva signaalina.