Transkriptsioonifaktorite RPB1, RPB2, TFG1, TFG2 ja TAF14 mutatsioonanalüüsiks sobivate pärmitüvede konstrueerimine ja TAF14 deletsioonimutantide uurimine pagaripärmis (Saccharomyces cerevisiae)

Abstract

Käesoleva töö käigus valmistati transkriptsioonil olulisi geene RPB1, RPB2, TFG1, TFG2 ja TAF14 ekspresseerivad plasmiidid. Teiseks koostati nende geenide genoomsete deletsioonidega tüved, millesse transformeeriti kirjeldatud plasmiidid metsiktüüpi geenikoopiatega ning mida saab kasutada mutatsioonanalüüsiks. Töö kolmanda osana uuriti Taf14 N- ja C-terminaalsete domeenide individuaalset mõju taf14Δ pärmitüves. Lisaks kombineeriti Taf14 mutandid RNA polümeraas II subühiku Rpb9 deletsiooniga tüves, hindamaks mutantide võimalikku komplementeerivat efekti taf14Δrpb9Δ rakkude letaalsele fenotüübile. Töö tulemustest selgub, et N-terminaalse valguosa ekspressioon põhjustab sarnast fenotüüpi taf14Δ rakkudega ja üksnes N-terminaalne osa pole piisav kompenseerimaks kasvudefekte topeltmutantses pärmitüves. Taf14 C-terminaalse valguosa ekspressioon tagab kasvueelise nullmutandi ees taf14Δ rakkudes ning on piisav komplementeerima topeltmutantse tüve kasvu häireid.