Pagaripärmi valgu Whi7 puhastamine bakterist Escherichia coli

Laen...
Pisipilt

Kuupäev

Ajakirja pealkiri

Ajakirja ISSN

Köite pealkiri

Kirjastaja

Tartu Ülikool

Abstrakt

Käesoleva töö eesmärgiks on kloneerida pagaripärmi (Saccharomyces cerevisiae) valgu Whi7 geen bakteri Escherichia coli ekspressioonivektorisse ning välja töötada valgu Whi7 puhastamisprotokoll bakterist Escherichia coli. Valgu puhastamiseks kloneeriti pärmi Saccharomyces cerevisiae Whi7 geen bakteriaalsesse ekspresioonivektorisse ning transformeeriti saadud plasmiid E. coli ekspressioonitüvesse. Seejärel ekspresseeriti valku ekspressioonitüvedes ning viidi läbi valgu puhastamine denatureerivatel tingimustel kasutades immobiliseeritud metalli afiinsuskromatograafiat. Seejärel viidi läbi dialüüs valgu renatureerimiseks ning määrati valgu kontsentratsioon.

Kirjeldus

Märksõnad

valgu puhastamine, Whi7, afiinsuskromatograafia, valguekspressioon, rakutsükkel

Viide