Pagaripärmi valgu Whi7 puhastamine bakterist Escherichia coli
Date
2023
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Tartu Ülikool
Abstract
Käesoleva töö eesmärgiks on kloneerida pagaripärmi (Saccharomyces cerevisiae) valgu Whi7
geen bakteri Escherichia coli ekspressioonivektorisse ning välja töötada valgu Whi7
puhastamisprotokoll bakterist Escherichia coli.
Valgu puhastamiseks kloneeriti pärmi Saccharomyces cerevisiae Whi7 geen bakteriaalsesse
ekspresioonivektorisse ning transformeeriti saadud plasmiid E. coli ekspressioonitüvesse.
Seejärel ekspresseeriti valku ekspressioonitüvedes ning viidi läbi valgu puhastamine
denatureerivatel tingimustel kasutades immobiliseeritud metalli afiinsuskromatograafiat.
Seejärel viidi läbi dialüüs valgu renatureerimiseks ning määrati valgu kontsentratsioon.
Description
Keywords
valgu puhastamine, Whi7, afiinsuskromatograafia, valguekspressioon, rakutsükkel