Histidiinirikkad rakkudesse sisenevad peptiidid siRNA transpordiks

Abstract

Geeniteraapia üheks suurimaks väljakutseks on leida efektiivne ning ohutu transportmehhanism nukleiinhappemolekulide ja muude terapeutiliste ühendite viimiseks rakkudesse. Üheks edukaks kandidaadiks võivad olla rakku sisenevad peptiidid (RSP), mis suudavad rakku transportida nende külge seotud lastmolekule bioloogilise efekti saavutamise eesmärgil. Antud bakalaureusetöö eesmärgiks oli välja selgitada RSP NickFect55 (NF55) histidiine sisaldavate pH-tundlike analoogide H4-C18, H6-C20, H61-C18 ja H8-C20 hulgast parim, mida kasutada kaheahelalise lühikese interferentsi-RNA (siRNA) raku tsütoplasmasse transportimiseks geenivaigistamise eesmärgiga. Käesolevas töös on leitud, et antud RSP-dest on optimaalseim H6-C20, mis moodustab siRNA-ga hepariinisoolade ja proteinaas K juuresolekul stabiilse kompleksi. Samuti saavutab siRNA/H6-C20 kompleks soovitud bioloogilise efekti transfektsioonil U87-luc2 või CHO-GFP rakkudesse ega oma in vitro katsetes kasutatud kontsentratsioonidel rakkude elumusele negatiivset mõju.