Eukarüootse valgukompleksi Cbf5-Gar1-Nop10-Nhp2 puhastamine ja aktiivsuse kontroll in vitro pseudouridülatsioonil
Abstract
Käesoleva töö eesmärk oli puhastada välja pseudouridülatsiooni teostava Saccharomyces
cerevisiae-st pärit H/ACA ribonukleoproteiin-kompleksi valgud ja testida kompleksi aktiivsust
in vitro pseudouridülatsioonil.
Kompleksi moodustamiseks optimeeriti valkude ekspressioon E. coli ekspressioonitüvedes,
puhastati valgud afiinsuskromatograafia meetoditega ning sünteesiti kompleksi kuuluv giid RNA ja pseudouridülatsioonireaktsiooni substraat-RNA kasutades in vitro transkriptsiooni.
Moodustatud kompleksi aktiivsust hinnati triitiumi vabanemise kaudu, kasutades triitiumiga
märgitud substraat-RNA-d.
Collections
The following license files are associated with this item:
Except where otherwise noted, this item's license is described as openAccess