HPV5-E1HA-E2Flag-E8- ja HPV5-E1HA-NLuc-E2Flag-E8- genoomide konstrueerimine ning nende replikatsioonivõime uurimine U2OS rakkudes ja inimese primaarsetes keratinotsüütides

Abstract

Inimese papilloomiviirused on tsirkulaarse kaheahelalise DNA-ga peamiselt sugulisel teel levivad viirused, mis nakatavad inimese naha- ja limaskesta basaalkihi keratinotsüüte. Kõrge riskiga inimese papilloomiviirused põhjustavad inimorganismis erinevate vähivormide teket, millest levinuim on emakakaelavähk. Viiruse elutsükli uurimiseks kasutatakse laboritingimustes osteosarkoomi rakke (U2OS). U2OS rakud ei ole aga HPV peremeesrakud, mistõttu on vähivastaste ravimeetodite välja töötamiseks oluline uurida viiruse elutsüklitinimese primaarsetes keratinotsüütides. Bakalaureusetöö eesmärk oli konstrueerida genoomid HPV5-E1HA-E2Flag-E8-ja HPV5-E1HA-NLuc-E2Flag-E8-ning hinnata nende genoomide potentsiaalset sobivust stabiilse rakuliini loomiseks primaarsetes keratinotsüütides, uurides vastavate genoomide replikatsioonivõimet nii U2OS rakkudes kui ka inimese primaarsetes keratinotsüütides.