Laktoosi selektsioonil põhineva testsüsteemi rakendamine mutatsiooniprotsesside uurimiseks bakteris Pseudomonas putida

Abstract

Varasemalt on näidatud, et uvrD geeni puudumisel tõuseb Pseudomonas putida mutantide tekkesagedus. Samas on P. putida mutatsioonide uurimisel seni kasutatud peamiselt fenooli kasutuselevõtul põhinevaid testsüsteeme, mille rakendatavus võib olla piiratud. Käesoleva töö eesmärk oli uurida bakteris P. putida laktoosi selektsioonil põhinevat mutantide tekkesageduse testsüsteemi alternatiivina fenoolil põhinevale süsteemile. Laktoosi kasutuselevõtul põhinev testsüsteem võimaldab tuvastada β-galaktosidaasi kodeerivasse geeni lacZ disainitud mutatsioonide reverteerumise järgi spetsiaalsete Lac-testertüvede võimekust hakata kasutama süsinikallikana laktoosi. Töö tulemusena selgus, et teadaolev P. putida uvrD mutaatorfenotüüp avaldub ka uues testsüsteemis. Lisaks oli võimalik hinnata ühe kindla lacZ geenis asuva asendusmutatsiooni ja kahe erineva raaminihkemutatsiooni reverteerumissagedust eraldi.