Pseudomonas putida KT2440 kasvustressi detekteerimine reporterplasmiidiga

Abstract

C1-ühendid, näiteks metanool ja formiaat, on potentsiaalsed alternatiivsed lähteained biopõhiste kemikaalide ja materjalide tootmiseks. Käesolevas bakalaureusetöös uuriti metanooli ja formiaadi mõju Pseudomonas putida KT2440 kasvustressile. Kasvatused viidi läbi täis- ja minimaalsöötmetes ning kasvustressi hindamiseks kasutati reporterplasmiide, mis põhinevad vastassuunalistelt promootoritelt ekspresseeritavatel fluorestseeruvatel reportervalkudel. Antud bakalaureusetöös leiti, et metanool inhibeerib bakterite kasvu kõige tugevamalt minimaalsöötmetes ning põhjustab rakkudes ulatuslikumaid füsioloogilisi muutuseid kui formiaat. Kasutatud kontsentratsioonidel ei mõjuta formiaat bakterite kasvu üheski uuritud söötmes ega põhjustanud ulatuslikke stressivastuseid, mistõttu ei muutunud ka promootoritelt ekspresseeritavate reportervalkude fluorestsentsisignaal.