Kilgi halvatuse viiruse 3C proteaasi lõikesaiti sisaldava valgu konstrueerimine, puhastamine ja lõikamine in vitro
Laen...
Failid
Kuupäev
Autorid
Ajakirja pealkiri
Ajakirja ISSN
Köite pealkiri
Kirjastaja
Tartu Ülikool
Abstrakt
Viirused sünteesivad proteaasi, mis toetab viiruse replikatsiooni ning valgusünteesi. Proteaas lõikab viiruse polüproteiini ning muudab viirusvalgud funktsionaalselt aktiivseks. Lisaks takistavad osade viirusete proteaasid rakkude viirusvastaseid kaitsemehhanisme ning häirivad rakulisi protsesse, et soodustada viiruse infektsiooni. Käesolevas töös konstrueeriti kilgi halvatuse viiruse 3C tsüsteiini proteaasi lõikesaiti sisaldav pDnaK_3C_RdRp plasmiid. Plasmiid ekspresseeriti Escherichia coli BL21(DE3) rakkudes ning puhastati kolonnkromatograafia ja dialüüsi meetodil. Puhastatud valk viidi reaktsiooni 3C tsüsteiini proteaasiga ning konkreetse lõikesaidiga proteaasi lõikeaktiivsust testida SDS-PAGE meetodil.
Kirjeldus
Märksõnad
viiruslik proteaas, proteaasi lõikesait, valgu ekspressioon, proteolüüs