Tal1 transkriptsioonifaktori uurimiseks vajalike CRISPR-Tal1 ja „Tet-OFF“ plasmiidide konstrueerimine

Abstract

Tal1 on transkriptsioonifaktor, millel on vererakkudes mitmeid olulisi funktsioone. Arengu käigus on Tal1 vajalik nii hematopoeetilise süsteemi tekkeks kui ka ektoopilise kardiomüogeneesi ärahoidmiseks. Samuti omab see transkriptsioonifaktor rolli ka T-rakulise leukeemia tekkimisel. Teadmised Tal1-e molekulaarsetest toimemehhanismidest on olulised erinevate terapeutiliste rakenduste arendamiseks. Käesoleva töö eesmärgiks oli konstrueerida Tal1 valgu funktsiooni edaspidiseks uurimiseks vajalikud vahendid – CRISPR konstrukt Tal1 geeni inaktiveerimiseks ning Tal1-e ekspressiooni kontrollimiseks doksutsükliiniga indutseeritav „Tet-OFF“ süsteem, mis võimaldaksid üheskoos luua hematopoeetilise püsirakuliini antud valgu funktsiooneerimise molekulaarsete mehhanismide uurimiseks in vitro.