Saccharomyces cerevisiae mitokondriaalse nukleaasi Din7 in vivo analüüs ja rekombinantse valgu ekspressioon

Abstract

Funktsionaalne mitokondriaalne genoom, mille metabolismis osalevad mitmed tuuma DNA-lt transleeritud valgud (k.a nukleaasid), kodeerib mõningaid elektrontranspordiahelas osalevaid komponente ning on oluline rakkude respiratoorse võime säilitamiseks. Käesolevas töös analüüsiti transformatsiooni teel saadud mitokondriaalset eksonukleaasi kodeeriva DIN7 geeni deletsiooni mõju S. cerevisiae rakkudele ning võrreldi seda respireeriva metsiktüüpi tüvega. Lisaks konstrueeriti Din7 valgu ekspressioonivektor edaspidiseks puhastamiseks ning optimeeriti liitvalgu ekspressiooni tingimusi (kasvusööde ja ekspressioonitemperatuur). Töö tulemused kinnitavad, et Din7 valk ei ole hädavajalik funktsionaalse mtDNA säilitamisega seotud protsessides